单峰骆驼感染中东呼吸综合征冠状病毒:疫情调查
摘要
背景 中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)感染人群后可导致严重的下呼吸道感染。已有研究证实单峰骆驼是这类病毒的宿主。本研究检测了与发生于2013年10月的2例人类MERS-CoV感染病例相关联的卡塔尔农场内的单峰骆驼中MERS-CoV的携带情况。
方法 采集卡塔尔农场内所有骆驼的鼻拭子、肛拭子和血清标本。通过逆转录酶(reverse transcription,RT)-聚合酶链锁反应(polymerase chain reaction,PCR)靶向扩增载脂蛋白E基因(UPE),核蛋白基因(N)及开放读码框架(open reading frame,ORF)1a对采集的拭子进行检测。PCR检测阳性的标本,再采用检测不同MERS-CoV的特异性PCR检测方法进行检测,将获得的基因序列和与之相关联的人类感染病例及其他人类感染病例中获得的基因序列进行系统进化分析。对获得的血清样本进行免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)免疫荧光检测、蛋白质芯片检测和病毒中和实验。
结果 我们于2013年10月17日共收集到14只骆驼的标本。对从3只骆驼中采集的鼻拭子,采用三种独立的RT-PCR方法进行了MERS-CoV检测和基因测序。ORF1a基因片段(940个核苷酸)和一个4.2 Kb基因片段的核苷酸序列,与在该农场感染的2例人类患者中以及从Hafr-A1-Batin分离出的MERS-CoV基因序列极为相似。另外8只骆驼的鼻拭子检测结果显示MERS-CoV一次或多次检测阳性,但未能经基因测序证实。抗体检测结果显示,所有骆驼体内具有与MERS-CoV中和抗体紧密相关的MERS-CoV棘突结合抗体。
结论 本研究经病毒学检测证实骆驼中携带有MERS-CoV,并表明近期在人类和骆驼中出现了一次MERS-CoV感染暴发疫情。但我们未能推断在卡塔尔农场中的人类感染是来自于骆驼,还是正好相反,又或者有其他来源。
研究资金来源 欧盟EMPERIE项目(合同编号:223498),ANTIGONE项目(合同编号:278976)和VIRGO财团
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